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測(cè)定意義：

淀粉是植物中糖的主要儲(chǔ)存形式，其含量測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)食品營養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。

測(cè)定原理：

利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進(jìn)一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測(cè)定葡萄糖含量，即可計(jì)算淀粉含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸（不允許快遞）、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；

淀粉提?。?/span>

1. 稱取約0.1g樣品于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常溫離心5min，棄上清，留沉淀。
2. 沉淀中加入0.5mL雙蒸水，放入沸水浴中糊化15min（蓋緊，以防止水分散失）。
3. 冷卻后，加入0.35mL試劑二，常溫提取15min，振蕩3-5次。
4. 加入0.85mL雙蒸水，混勻，3000g，常溫離心10min，取上清液待測(cè)。

測(cè)定操作表（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。

3、工作液的配制：臨用前在試劑三中加入7.5mL蒸餾水后，緩慢加入42.5mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。

4、樣本測(cè)定：取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中，95度水浴10 min（蓋緊，防止水分散失），自然冷卻至室溫，在620 nm 波長下記錄測(cè)定吸光度值A。

淀粉含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 5.872x - 0.0295；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計(jì)算

淀粉含量(mg/mg prot)=(A+0.0295) ÷5.872 ÷Cpr=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2、按樣本鮮重計(jì)算

淀粉含量(mg/g 鮮重)=(A+0.0295)÷5.872÷(W÷V樣總) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V樣總：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g

注意：若A大于5，則需要將樣本上清液適當(dāng)稀釋后測(cè)定。

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